Quer esteja a começar na investigação de peptídeos ou seja um cientista experiente, ter uma compreensão clara da terminologia essencial é fundamental para trabalhar nesta área. Este glossário abrangente cobre mais de 60 termos organizados por categoria, desde conceitos fundamentais de bioquímica até técnicas laboratoriais especializadas e normas de controlo de qualidade.
Todos os compostos referidos neste glossário destinam-se apenas a investigação. Este conteúdo não constitui aconselhamento médico nem recomenda qualquer substância para consumo humano.
Química básica dos peptídeos
Aminoácido: Uma molécula orgânica que contém tanto um grupo amino (-NH2) como um grupo carboxilo (-COOH). Vinte aminoácidos padrão servem como blocos de construção de peptídeos e proteínas. Cada aminoácido tem uma cadeia lateral única (grupo R) que determina as suas propriedades químicas.
Peptídeo: Uma cadeia curta de aminoácidos ligados por ligações peptídicas, contendo normalmente entre 2 e 50 resíduos de aminoácidos. Os peptídeos distinguem-se das proteínas principalmente pelo seu menor comprimento de cadeia.
Ligação peptídica: Uma ligação química covalente formada entre o grupo carboxilo de um aminoácido e o grupo amino de outro através de uma reação de condensação (com libertação de água). As ligações peptídicas formam a espinha dorsal de todas as cadeias peptídicas.
Dipeptídeo: Um peptídeo composto por exatamente dois resíduos de aminoácidos unidos por uma única ligação peptídica. Os dipeptídeos representam a forma mais simples de peptídeo.
Oligopeptídeo: Um peptídeo que contém entre 2 e 20 resíduos de aminoácidos. A maioria dos peptídeos de investigação enquadra-se neste intervalo de tamanho.
Polipeptídeo: Uma cadeia mais longa de aminoácidos, contendo normalmente mais de 20 resíduos. Os polipeptídeos que excedem aproximadamente 50 resíduos e adotam estruturas tridimensionais complexas são geralmente classificados como proteínas.
Estrutura primária: A sequência linear de aminoácidos numa cadeia peptídica, lida do N-terminal para o C-terminal. A estrutura primária é o nível mais fundamental de organização peptídica e determina todas as propriedades estruturais de ordem superior.
Estrutura secundária: Padrões locais de dobragem numa cadeia peptídica, incluindo hélices alfa e folhas beta, estabilizados por ligações de hidrogénio entre átomos da espinha dorsal.
Ligação dissulfureto: Uma ligação covalente formada entre os átomos de enxofre de dois resíduos de cisteína. As ligações dissulfureto desempenham um papel crítico na estabilização da estrutura terciária dos peptídeos e são importantes em muitos peptídeos bioativos.
N-terminal (terminal amino): A extremidade de uma cadeia peptídica que apresenta um grupo amino livre (-NH2). Por convenção, as sequências peptídicas são escritas a partir do N-terminal.
C-terminal (terminal carboxilo): A extremidade de uma cadeia peptídica que apresenta um grupo carboxilo livre (-COOH). O C-terminal é o ponto final na leitura de uma sequência peptídica.
Peso molecular (MW): A soma dos pesos atómicos de todos os átomos numa molécula peptídica, normalmente expressa em Daltons (Da). O peso molecular é usado para calcular concentrações molares em aplicações de investigação. Consulte a nossa calculadora de reconstituição de peptídeos para cálculos práticos baseados em MW.
Ponto isoelétrico (pI): O pH no qual um peptídeo não apresenta carga elétrica líquida. O pI influencia a solubilidade, o comportamento cromatográfico e a estabilidade em solução.
Tipos e classificações de peptídeos
Peptídeo biorregulador: Peptídeos curtos (normalmente 2-4 aminoácidos) estudados pelo seu potencial papel na regulação da expressão genética específica e das funções celulares. Exemplos incluem Epithalon e Vilon, que são temas de investigação em curso.
Peptídeo de fator de crescimento: Peptídeos estudados pelo seu papel em vias de sinalização relacionadas com o crescimento, proliferação e diferenciação celular. Os compostos de investigação nesta categoria incluem peptídeos libertadores da hormona do crescimento (GHRPs) e secretagogos da hormona do crescimento.
Neuropeptídeo: Peptídeos encontrados em tecido neural que funcionam como moléculas de sinalização no sistema nervoso. Exemplos de investigação incluem Selank e Semax, que são estudados pelas suas interações com sistemas de neurotransmissores.
Peptídeo cíclico: Um peptídeo em que a cadeia de aminoácidos forma uma estrutura em anel, seja através de uma ligação peptídica entre os terminais N e C, seja através de ligações de cadeia lateral. Os peptídeos cíclicos exibem frequentemente estabilidade e biodisponibilidade melhoradas em comparação com os seus equivalentes lineares.
Análogo peptídico: Uma versão modificada de um peptídeo de ocorrência natural, concebida para alterar propriedades como estabilidade, afinidade pelo recetor ou semi-vida. Muitos peptídeos de investigação são análogos concebidos para melhorar sequências naturais.
Conjugado peptídico: Um peptídeo ligado quimicamente a outra molécula (como um ácido gordo, polímero ou molécula pequena) para modificar as suas propriedades farmacocinéticas ou funcionais. A PEGilação é uma estratégia comum de conjugação usada em investigação.
Peptídeo em tandem (mistura): Uma preparação de investigação que contém dois ou mais peptídeos combinados em rácios específicos para investigação de efeitos sinérgicos. O nosso blogue de investigação cobre várias combinações peptídicas bem estudadas.
SARMs (moduladores seletivos dos recetores androgénicos): Uma classe de compostos que se ligam seletivamente aos recetores androgénicos. Embora não sejam peptídeos por definição química, os SARMs são frequentemente estudados juntamente com peptídeos em contextos de investigação devido a áreas de investigação sobrepostas.
Metodologia laboratorial e de investigação
Reconstituição: O processo de dissolver um peptídeo liofilizado (seco por congelação) num solvente adequado, normalmente água bacteriostática ou água estéril, para criar uma solução numa concentração desejada. Uma técnica de reconstituição adequada é crítica para investigação precisa. Use a nossa calculadora de reconstituição para determinar volumes exatos.
Liofilização (secagem por congelação): Um processo de desidratação usado para preservar peptídeos congelando a solução e depois reduzindo a pressão circundante para permitir que a água congelada sublime diretamente de sólido para gás. Os peptídeos liofilizados exibem estabilidade superior a longo prazo em comparação com soluções.
Água bacteriostática (BAC Water): Água estéril que contém 0.9% de álcool benzílico como conservante, usada como solvente para reconstituir peptídeos liofilizados. O álcool benzílico inibe o crescimento microbiano, permitindo frascos de uso múltiplo durante um período prolongado (normalmente até 28 dias).
Água estéril (WFI — água para injeção): Água altamente purificada isenta de pirogénios e microrganismos. Ao contrário da água bacteriostática, a água estéril não contém conservante e deve ser usada apenas para aplicações de dose única.
Aliquotagem: A prática de dividir uma solução peptídica reconstituída em porções mais pequenas, de uso individual, para minimizar ciclos de congelação-descongelação e o risco de contaminação. A aliquotagem é uma boa prática para preservar a integridade peptídica.
Diluição seriada: Uma técnica de diluição por etapas em que uma solução peptídica concentrada é progressivamente diluída por um fator constante. As diluições seriadas são usadas para preparar curvas dose-resposta e padrões de calibração em investigação.
Molaridade (M): Uma unidade de concentração definida como moles de soluto por litro de solução. As concentrações em investigação de peptídeos são frequentemente expressas em unidades micromolares (μM) ou nanomolares (nM).
Solução stock: Uma solução concentrada de um peptídeo preparada como lote-mestre a partir do qual são diluídas soluções de trabalho. As soluções stock são normalmente armazenadas congeladas em alíquotas.
Veículo (controlo): O solvente ou transportador usado para dissolver um peptídeo, administrado sem o composto ativo como controlo negativo em experiências de investigação. Controlos de veículo adequados são essenciais para um desenho experimental válido.
In Vitro: Investigação conduzida fora de um organismo vivo, normalmente em culturas celulares, amostras de tecido ou ensaios bioquímicos. Latim para “em vidro.”
In Vivo: Investigação conduzida dentro de um organismo vivo, como estudos em modelos animais. Latim para “no vivo.”
Curva dose-resposta: Uma representação gráfica da relação entre a quantidade de um peptídeo administrada e a magnitude do efeito observado. Estudos dose-resposta são fundamentais para caracterizar a atividade peptídica.
Semi-vida (t1/2): O tempo necessário para que a concentração ou atividade de um peptídeo diminua para metade. Compreender a semi-vida é crítico para desenhar protocolos experimentais de dosagem.
Biodisponibilidade: A fração de um peptídeo administrado que atinge a circulação sistémica ou o local-alvo numa forma ativa. A via de administração tem impacto significativo na biodisponibilidade peptídica.
Controlo de qualidade e métodos analíticos
Certificado de análise (COA): Um documento emitido por um fabricante, pelo laboratório próprio de um vendedor ou por um laboratório independente, que comunica os resultados dos testes realizados numa amostra de um produto peptídico, como a sua identidade, pureza ou teor. Solicite e reveja sempre os COAs antes de usar qualquer peptídeo de investigação. Saiba como interpretar estes documentos na nossa página Qualidade e ciência.
HPLC (cromatografia líquida de alta eficiência): A técnica analítica de referência para determinar a pureza peptídica. A HPLC separa os componentes de uma mistura com base nas suas interações diferenciais com uma fase estacionária e uma fase móvel, produzindo um cromatograma que revela a percentagem de pureza e os perfis de impurezas. Leia o nosso guia detalhado de HPLC para mais informações.
Espectrometria de massa (MS): Uma técnica analítica que mede a razão massa-carga de iões para determinar o peso molecular e a identidade estrutural de um peptídeo. A MS é o método definitivo para confirmar a identidade peptídica e detetar modificações ou truncamentos.
LC-MS (cromatografia líquida-espectrometria de massa): Uma técnica combinada que acopla separação por HPLC com deteção por espectrometria de massa. A LC-MS fornece avaliação de pureza e identificação molecular numa única corrida analítica.
Pureza (% de pureza): A proporção do peptídeo-alvo presente numa amostra em relação ao teor total de peptídeos, normalmente determinada por HPLC. Os peptídeos de grau de investigação exigem geralmente uma pureza mínima de 95%, com preparações de elevada pureza a exceder 98%. As páginas de produto apresentam uma especificação ao nível da classe, quando existe uma registada, e enviamos lotes selecionados à Janoshik para testes independentes. Consulte um lote na nossa página de verificação de pureza.
Teste de endotoxinas (ensaio LAL): O ensaio do lisado de amebócitos de Limulus deteta endotoxinas bacterianas (lipopolissacáridos) que podem contaminar preparações peptídicas. A contaminação por endotoxinas pode confundir resultados de investigação, particularmente em culturas celulares e estudos in vivo.
Teste de biocarga: Medição quantitativa dos microrganismos viáveis presentes numa amostra peptídica. Uma biocarga baixa confirma que foram mantidas condições assépticas de fabrico durante a produção.
Análise de aminoácidos (AAA): Uma técnica quantitativa que hidrolisa um peptídeo nos seus aminoácidos constituintes e mede as suas concentrações. A AAA verifica a composição peptídica e é usada para determinação precisa da concentração.
Teor peptídico: A percentagem de peptídeo ativo numa amostra liofilizada por peso, tendo em conta água, sais e contra-iões. O teor peptídico é distinto da pureza: uma amostra pode ser 99% pura por HPLC mas conter apenas 70-80% de peptídeo por peso devido a humidade ligada e contra-iões.
TFA (ácido trifluoroacético): Um contra-ião comummente associado a peptídeos sintéticos como resíduo da purificação por HPLC. Os sais de TFA aumentam o peso aparente de um peptídeo e podem afetar a viabilidade celular em investigação a concentrações elevadas. Formas salinas de acetato estão disponíveis como alternativa.
GMP (Boas Práticas de Fabrico): Um sistema de normas de garantia de qualidade que assegura que os produtos são produzidos e controlados de forma consistente segundo especificações de qualidade definidas. Os peptídeos de grau GMP são fabricados sob as condições mais rigorosas.
Armazenamento e manuseamento
Cadeia de frio: Uma série ininterrupta de etapas de armazenamento e distribuição com temperatura controlada que mantém um peptídeo dentro do seu intervalo de temperatura especificado desde o fabrico até à entrega. Quebrar a cadeia de frio pode levar à degradação irreversível do peptídeo.
Dessecante: Uma substância higroscópica (como gel de sílica) colocada juntamente com peptídeos liofilizados durante o armazenamento para absorver humidade e prevenir degradação hidrolítica. Armazene sempre peptídeos liofilizados com dessecante.
Sensibilidade à luz (fotodegradação): A suscetibilidade de certos peptídeos à degradação quando expostos à luz, particularmente à radiação UV. Peptídeos sensíveis à luz devem ser armazenados em frascos âmbar ou envolvidos em folha de alumínio. Peptídeos que contêm triptofano são especialmente fotolábeis.
Ciclo de congelação-descongelação: Um único episódio de congelação de uma solução peptídica seguido do seu descongelamento para líquido. Ciclos repetidos de congelação-descongelação causam degradação peptídica progressiva através da formação de cristais de gelo, agregação e desnaturação de superfície. Limite os ciclos de congelação-descongelação a menos de 3 para estabilidade ideal.
Agregação: O processo pelo qual moléculas peptídicas se autoassociam para formar aglomerados ou partículas insolúveis. A agregação reduz a concentração efetiva de peptídeo ativo e pode ser desencadeada por flutuações de temperatura, agitação ou condições de pH desfavoráveis.
Degradação: A decomposição química ou física de um peptídeo ao longo do tempo, resultando em perda de integridade estrutural e atividade biológica. Vias comuns de degradação incluem oxidação (particularmente de resíduos de metionina e triptofano), desamidação (de asparagina e glutamina) e hidrólise de ligações peptídicas.
Oxidação: Uma reação química que envolve a perda de eletrões, afetando comummente resíduos de metionina e cisteína em peptídeos. A oxidação pode ser minimizada purgando frascos com gás inerte (azoto ou árgon) antes da selagem e armazenando sob condições adequadas.
Higroscópico: Uma propriedade que descreve uma substância que absorve prontamente humidade da atmosfera circundante. Muitos peptídeos liofilizados são altamente higroscópicos e devem ser protegidos da humidade durante o armazenamento e manuseamento.
Síntese e fabrico de peptídeos
Síntese peptídica em fase sólida (SPPS): O método dominante para fabricar peptídeos sintéticos, desenvolvido por Robert Bruce Merrifield (Nobel Prize, 1984). Na SPPS, a cadeia peptídica é montada passo a passo numa resina polimérica insolúvel, com cada aminoácido adicionado sequencialmente do C-terminal para o N-terminal.
Química Fmoc: A estratégia de grupo protetor mais amplamente usada na SPPS moderna. Fmoc (9-fluorenilmetoxicarbonilo) protege o grupo alfa-amino durante a síntese e é removido sob condições básicas suaves (normalmente 20% piperidine in DMF), permitindo a síntese de sequências peptídicas sensíveis.
Reagente de acoplamento: Um reagente químico usado na SPPS para ativar o grupo carboxilo de um aminoácido que entra, facilitando a formação da ligação peptídica com o grupo amino livre na cadeia em crescimento. Reagentes de acoplamento comuns incluem HBTU, HATU e DIC.
Clivagem: A etapa final na SPPS em que o peptídeo concluído é libertado quimicamente da resina de suporte sólida, normalmente usando ácido forte (como TFA). A clivagem também remove grupos protetores de cadeias laterais.
Peptídeo bruto: O peptídeo não purificado obtido imediatamente após a clivagem da resina. Peptídeos brutos contêm a sequência-alvo juntamente com sequências de deleção, truncamentos e outras impurezas sintéticas que devem ser removidas por purificação.
Purificação: O processo de isolar o peptídeo-alvo de impurezas sintéticas, normalmente realizado usando HPLC preparativa. A purificação é a etapa que eleva um peptídeo bruto à qualidade de grau de investigação.
Troca de contra-ião: Um processo em que o contra-ião associado a um peptídeo (comummente TFA da purificação por HPLC) é substituído por um ião alternativo, como acetato ou cloridrato. A troca de contra-ião pode ser necessária para aplicações de investigação específicas em que a interferência de TFA é uma preocupação.
Síntese peptídica personalizada: O fabrico de peptídeos segundo requisitos específicos de sequência, pureza e quantidade de um investigador. A síntese personalizada permite a investigação de novas sequências, modificações e análogos não disponíveis como produtos de catálogo.
Aplicações e terminologia de investigação
Afinidade de ligação ao recetor: Uma medida de quão fortemente um peptídeo interage com o seu recetor-alvo, normalmente expressa como constante de dissociação (Kd). Valores Kd mais baixos indicam maior afinidade. A afinidade de ligação é um parâmetro-chave na caracterização da atividade peptídica em investigação.
Agonista: Uma molécula que se liga a um recetor e o ativa, produzindo uma resposta biológica. Muitos peptídeos de investigação funcionam como agonistas em alvos recetores específicos.
Antagonista: Uma molécula que se liga a um recetor sem o ativar, bloqueando assim o recetor e impedindo a ativação por agonistas ou ligandos endógenos.
Seletividade: O grau em que um peptídeo interage preferencialmente com um tipo ou subtipo de recetor em detrimento de outros. Uma seletividade elevada é desejável em investigação para atribuir efeitos observados a um alvo específico.
EC50 (concentração efetiva semimáxima) — A concentração de um peptídeo que produz 50% do seu efeito máximo possível. EC50 é uma métrica padrão para comparar a potência de diferentes peptídeos ou análogos.
IC50 (concentração inibitória semimáxima): A concentração de um peptídeo necessária para inibir um processo biológico específico em 50%. IC50 é comummente usada em ensaios de inibição enzimática e viabilidade celular.
Farmacocinética (PK): O estudo de como um peptídeo é absorvido, distribuído, metabolizado e excretado (ADME) ao longo do tempo. Os parâmetros PK orientam o desenho de protocolos de dosagem em estudos de investigação.
Degradação proteolítica: A decomposição enzimática de peptídeos por proteases (enzimas que digerem proteínas). A suscetibilidade proteolítica é um grande desafio na investigação de peptídeos, impulsionando o desenvolvimento de análogos estabilizados e estratégias alternativas de entrega.
Referência rápida: abreviaturas comuns
| Abreviatura | Termo completo |
|---|---|
| AA | Aminoácido |
| AAA | Análise de aminoácidos |
| BAC Water | Água bacteriostática |
| COA | Certificado de análise |
| Da / kDa | Dalton / Kilodalton (unidades de peso molecular) |
| ELISA | Ensaio de imunoabsorção enzimática |
| Fmoc | 9-fluorenilmetoxicarbonilo |
| GMP | Boas Práticas de Fabrico |
| HPLC | Cromatografia líquida de alta eficiência |
| LAL | Lisado de amebócitos de Limulus (teste de endotoxinas) |
| LC-MS | Cromatografia líquida-espectrometria de massa |
| MW | Peso molecular |
| PEG | Polyethylene Glycol (usado na PEGilação) |
| pI | Ponto isoelétrico |
| PK | Farmacocinética |
| RP-HPLC | HPLC de fase reversa |
| SPPS | Síntese peptídica em fase sólida |
| TFA | Ácido trifluoroacético |
| WFI | Água para injeção |
Leitura adicional
Expanda a sua compreensão da investigação de peptídeos com estes recursos da CertaPeptides:
- Qualidade e ciência — Como documentamos a qualidade: na página de produto, uma especificação ao nível da classe, quando existe uma registada, e testes independentes realizados por terceiros, sobretudo pela Janoshik, em lotes selecionados (cada relatório publicado apresenta os seus próprios resultados medidos).
- Verificação de pureza — Consulte o código do rótulo do seu frasco: a página mostra o que a CertaPeptides publica para esse código e, para um lote retirado, a retirada e o motivo. Se a pesquisa do código não devolver resultados, envie-nos esse código por e-mail.
- Calculadora de reconstituição — Calcule volumes de reconstituição precisos com base no peso molecular do peptídeo e na concentração desejada.
- Blogue de investigação — Artigos aprofundados sobre BPC-157, TB-500, GHK-Cu, Semaglutide, armazenamento de peptídeos, interpretação de COA e muito mais.
Este glossário é mantido pela CertaPeptides. Todos os compostos referidos são vendidos estritamente para investigação in vitro e uso laboratorial. Não se destinam a consumo humano.
Referências
- Fosgerau K, Hoffmann T. (2015). Peptide therapeutics: current status and future directions. Drug Discovery Today, 20(1), 122-128. PMID: 25450771.
- Lau JL, Dunn MK. (2018). Therapeutic Peptides: Historical perspectives, current development trends, and future directions. Bioorganic & Medicinal Chemistry, 26(10), 2700-2707. PMID: 28720325.
- Muttenthaler M, et al. (2021). Trends in peptide drug discovery. Nature Reviews Drug Discovery, 20(4), 309-325. PMID: 33536635.
Verifique antes de investigar
As páginas de produto apresentam uma especificação ao nível da classe, quando existe uma registada, e os lotes selecionados incluem um COA independente de terceiros.