Na semana passada recebemos os nossos primeiros três relatórios de teste independentes da Janoshik Analytical. Os resultados estão agora publicamente disponíveis — e pode verificar cada número por si.
Eis porque optámos por investir em testes independentes por terceiros, o que os relatórios mostraram e o que isso significa para investigadores que encomendam connosco.
O problema dos testes internos
Todos os fornecedores de peptídeos afirmam “testado por terceiros” ou “verificado por HPLC.” Mas, quando pede o certificado, o que normalmente recebe é um documento gerado pelo próprio vendedor. Não há forma de verificar de modo independente se o teste foi realmente realizado, se o número de lote corresponde, ou se o número de pureza não foi editado no Photoshop.
As páginas de produto apresentam uma especificação ao nível da classe, quando existe uma registada, e enviamos lotes selecionados à Janoshik para testes independentes. Reconhecemos que pedir-lhe que confie na documentação do próprio fornecedor é pedir muito — especialmente quando está a avaliar um novo fornecedor.
Os COAs internos de fornecedores de peptídeos são tão fiáveis quanto o fornecedor que os emite. Sem verificação independente, não há forma de distinguir um certificado legítimo de um fabricado.
Porquê a Janoshik?
A Janoshik Analytical tem sido o laboratório independente de testes de peptídeos de referência na comunidade de investigação há mais de uma década. Os investigadores utilizam a página pública de verificação do laboratório para verificar os relatórios dos fornecedores. Cada relatório da Janoshik que publicamos traz um task number e uma unique key que abrem o original na própria página de verificação da Janoshik, para que uma cópia possa ser comparada com ele.
Escolhemo-los porque queríamos que os nossos clientes pudessem verificar as nossas afirmações sem dependerem apenas da nossa palavra. Os relatórios ficam no website da Janoshik, não no nosso. Não temos qualquer controlo sobre o que encontram ou publicam.
Várias características tornam os testes da Janoshik particularmente credíveis para a comunidade de investigação:
- Portal público de verificação: Cada relatório da Janoshik que publicamos tem o seu próprio URL em verify.janoshik.com. Qualquer pessoa pode verificar o relatório sem nos contactar.
- Originais verificáveis: O task number e a unique key de cada relatório da Janoshik que publicamos abrem o original na página de verificação da Janoshik, para que uma cópia possa ser comparada com ele.
Compreender os métodos de teste
Para investigadores que avaliam COAs — sejam os nossos ou os de qualquer outra entidade — ajuda compreender o que cada teste mede de facto e o que não mede.
Pureza por HPLC (cromatografia líquida de alta eficiência): Esta é a principal métrica de qualidade para peptídeos de investigação. A HPLC separa a amostra nos seus componentes com base na sua interação com uma fase estacionária e um gradiente de fase móvel. A percentagem de pureza representa a área do pico principal relativamente à área total integrada dos picos. Um resultado de 99.766% significa que o pico principal representa 99.766% da área dos picos detetados; o relatório não identifica os outros picos.
O que a HPLC não lhe diz: conteúdo de peptídeo (quanto da massa liofilizada total é peptídeo ativo versus contra-íons e água), confirmação de identidade (a HPLC por si só não consegue distinguir entre peptídeos de hidrofobicidade semelhante), ou a presença de contaminantes que não absorvem UV.
Espectrometria de massa (MS): Confirma a identidade molecular medindo o peso molecular exato do peptídeo. Para um peptídeo corretamente sintetizado, a massa observada deve corresponder à massa teórica dentro da tolerância do instrumento (tipicamente +/- 1 Da para ionização por electrospray). A espectrometria de massa deteta problemas que a HPLC pode não detetar — como substituições de aminoácidos que, por acaso, eluem no mesmo tempo de retenção que o peptídeo-alvo.
Análise gravimétrica (peso da amostra): Mede a massa real de peptídeo liofilizado no frasco. Esta é comparada com o peso de enchimento rotulado. A amostra testada de Selank mediu 11.56 mg face a um rótulo de 10 mg, e a amostra testada de Epitalon 45.31 mg face a um rótulo de 50 mg; cada valor diz respeito à amostra testada.
O que encontraram
| Produto | Rotulado | Peso real | Pureza por HPLC | Relatório |
|---|---|---|---|---|
| Selank | 10mg | 11.56mg | 99.788% | Ver relatório |
| Epitalon | 50mg | 45.31mg | 98.005% | Ver relatório |
O resultado do Epitalon de 98.005% é inferior ao resultado do Selank.
Publicamos o resultado do Epitalon exatamente como a Janoshik o comunicou. Transparência significa mostrar também os números menos favoráveis.
O que os números significam em contexto
Para investigadores que avaliam estes resultados face ao mercado mais amplo:
- Selank a 99.788%: A amostra testada mediu 11.56 mg, 15.6% acima do rótulo de 10 mg; o relatório diz respeito a essa amostra, e não a cada frasco.
- Epitalon a 98.005%: Acima da especificação ao nível da classe de ≥98% registada para o Epitalon. O pico principal representa 98.005% da área dos picos detetados; o relatório não identifica os outros picos. A amostra testada mediu 45.31 mg, 9.4% abaixo do rótulo; esse valor diz respeito à amostra testada, e não à totalidade dos frascos.
Como ler um COA de peptídeo
Quer esteja a avaliar a CertaPeptides ou qualquer outro fornecedor, saber ler criticamente um Certificado de Análise protege o seu investimento em investigação. Eis o que verificar:
- Método de pureza: Procure “RP-HPLC” (HPLC de fase reversa). Alguns COAs indicam “pureza por TLC” (cromatografia em camada fina), que é um método menos preciso e inadequado para análise quantitativa de peptídeos.
- Confirmação do peso molecular: O COA deve incluir um resultado de MS que confirme o peso molecular esperado. Sem isto, não tem verificação de identidade — apenas uma percentagem de pureza para uma substância não identificada.
- Número de lote: Cada COA deve fazer referência a um lote específico. Se encomendar o mesmo produto duas vezes e receber COAs com números de lote idênticos mas datas de encomenda diferentes, isso é um sinal de alerta — o fornecedor pode estar a reutilizar um único COA em vários lotes.
- Aparência e solubilidade: A caracterização física básica regista o que o laboratório observou na amostra testada. Um COA que lista apenas a pureza, sem aparência, solubilidade ou outras propriedades físicas, pode ter sido gerado a partir de um modelo em vez de ser específico do lote.
- Contra-íon: Verifique se o peptídeo é fornecido como sal TFA, sal acetato ou base livre. Isto afeta o conteúdo líquido de peptídeo e pode ser relevante para ensaios sensíveis.
- Verificação independente: Os COAs mais credíveis vêm de, ou são verificáveis através de, laboratórios independentes como a Janoshik. Um certificado que pode cruzar com uma base de dados pública é fundamentalmente mais fiável do que um que não pode.
Como verificar estes resultados por si
Cada relatório da Janoshik que publicamos inclui um task number e uma unique key. Eis como verificar:
- Clique em qualquer ligação “Ver relatório” acima — abre no website da Janoshik, não no nosso
- Introduza o task number e a unique key do relatório na página de verificação da Janoshik (janoshik.com/verification) e compare aí a cópia com o original
- Verifique os resultados que o relatório apresenta, como a percentagem de pureza e o peso da amostra
Se um vendedor remover ou ocultar o task number ou a unique key num certificado Janoshik, isso é um sinal de alerta. Os relatórios da Janoshik que publicamos têm um task number e uma unique key, que pode verificar na própria página de verificação da Janoshik.
O nosso programa de testes contínuo
Planeamos enviar lotes adicionais para a Janoshik de forma contínua, priorizando os nossos produtos de maior volume. Os relatórios da Janoshik que publicamos aparecem tanto na nossa página de verificação como no portal público da Janoshik.
Também nos candidatámos ao programa Distinctive Branding da Janoshik, que acrescenta o nosso logótipo a todos os relatórios na sua página de listagens públicas, e à colocação Premium Top Page para máxima visibilidade.
A nossa lista de prioridades de teste para lotes futuros inclui:
- BPC-157 — o nosso peptídeo de investigação de maior volume
- Semaglutide e tirzepatide — peptídeos incretínicos
- GHK-Cu — peptídeo de cobre em que a precisão da quelação metálica afeta a atividade biológica
Se quiser ver produtos específicos testados a seguir, informe-nos. Estamos a construir este programa de verificação com base no que importa aos investigadores.
Porque a transparência importa para peptídeos de investigação
O mercado de peptídeos de investigação opera com supervisão regulatória mínima em comparação com compostos de grau farmacêutico. Isto cria uma assimetria de informação: os fornecedores sabem exatamente o que está nos seus produtos, mas os compradores têm de confiar nessa informação. Os testes independentes invertem essa dinâmica — dão aos investigadores acesso aos mesmos dados analíticos que os fornecedores têm, verificados por um terceiro neutro.
Os resultados Janoshik que publicamos incluem alguns menos favoráveis. Se publicássemos apenas resultados favoráveis, o exercício não seria mais fiável do que COAs emitidos por nós próprios. O resultado do Epitalon demonstra este princípio: uma pureza de 98% com subenchimento não é o número que queríamos publicar, mas é o número que a Janoshik encontrou, e publicá-lo é a única forma de tornar o programa de testes credível.
Para investigadores que avaliam qualquer fornecedor de peptídeos — incluindo nós — a verificação independente é o sinal de qualidade mais fiável disponível. Incentivamo-lo a verificar os nossos relatórios Janoshik, compará-los com os resultados de outros fornecedores no mesmo portal e tomar decisões de abastecimento com base em dados verificáveis em vez de afirmações de marketing.
Referências
- Sikiric P, Seiwerth S, Rucman R, Turkovic B, et al. (2011). Stable gastric pentadecapeptide BPC 157: novel therapy in gastrointestinal tract. Current Pharmaceutical Design, 17(16), 1612-1632. PMID: 21548867.
- Pickart L, Vasquez-Soltero JM, Margolina A. (2015). GHK Peptide as a Natural Modulator of Multiple Cellular Pathways in Skin Regeneration. BioMed Research International, 2015, 648108. PMID: 26236730.
Todos os produtos mencionados destinam-se exclusivamente a fins de investigação.
Verifique antes de investigar
As páginas de produto apresentam uma especificação ao nível da classe, quando existe uma registada, e os lotes selecionados incluem um COA independente de terceiros.